指南速览儿童肺炎支原体呼吸道感染实验

本文来源：选自《中华检验医学杂志,》,42(7):-.

本共识规范了儿童呼吸道Mp感染的实验室诊断方法的类型、概念和价值，旨在根据患者现症和既往、门诊和住院、筛查和确诊等不同的感染情况选择不同的检测方法，结合患者临床症状、体征以及胸片等其他辅助检查，同时对患者年龄、全身状况、用药、病程等综合判断，为临床Mp感染的诊断提供合理、经济、高效的参考建议。经归纳总结形成Mp实验室诊断流程图，见图1。

注：红色示确诊方法；紫色示初筛阳性，确诊需要病原学检测；黄色示疗效或复发评估

▲图1Mp呼吸道感染实验室诊断流程图

本共识涵盖病原学检测、血清学检测、药敏试验和耐药基因检测、肺炎支原体检测的质量控制等内容，本处仅就检验前的质量控制展开阐述，感兴趣读者可订阅中华检验医学杂志年第七期进行全文阅读。

肺炎支原体检测的质量控制

Mp检测的质量控制是获得准确可靠结果的前提，检验的质量控制从检验前、中、后质量控制三部分阐述。

（一）检验前质量控制

检验前质量控制主要是样本采集、运输、保存过程的质量控制和标准化，应作为重点培训和规范内容推广。

病原学检测标本采集尽可能采集多种类型的标本和（或）连续多个时间点采集不同部位的标本，以满足最低检测阈值采集量、阳性率和多种检测方法联合检测的需求。咽、鼻、喉拭子最易获得，痰液需判断是否合格，肺泡灌洗液的杂菌污染较少，不同标本的病原学检测灵敏度和特异性研究报道不一致，40%~80%不等，晨痰对呼吸道支原体的检测价值较高，可依据临床实际情况选择，具体操作规范见表1。用做核酸检测的样本容器不可含核酸酶，以防止核酸降解；容器内应预装具有防核酸降解功能的保存液，有利于标本保存和转运。呼吸道标本室温下30min内送检，4℃环境下2~4h内送检，标本4℃保存不应超过48h，预计延迟送检的标本应在－70℃条件下保存。血液应尽可能采集急性期和至少间隔2周的恢复期双份血清。

检测原理

样本类型

采集载体

采集方法、送检

病原学检测

咽拭子

塑料柄的尼龙拭子、涤纶拭子、植绒拭子（可吸附更多的生物样本并达到较高的释放率）或人造棉拭子（不要采用带木柄的棉花拭子，因为后者可能含有抑制支原体生长及抑制分子反应的成分）

采集前用生理盐水漱口，让患者头部微仰，嘱其张口发"啊"音，必要时使用压舌板轻压舌面，暴露咽喉，手持消毒拭子，以灵敏而轻柔的动作擦拭两侧腭弓、咽、扁桃体上的分泌物及上皮组织，稍微用力来回擦拭至少3次，然后再在咽后壁上下擦拭至少3次；取毕，将拭子插入试管，或放入适宜的保存液中，塞紧管口，注明标本采集时间，立即送检。洗脱时将拭子头浸入采样液中，把拭子头部与管壁接触数下，使标本尽量多地冲洗到采样液中。最好在使用抗菌药物治疗前采集标本。咽拭子必须保持湿润

样本采集注意事项：观察患者口腔黏膜、咽喉部有无红肿、溃疡、脓性分泌物等情况，采集前让家长、患者知晓采集部位及目的，并获得其积极配合

鼻、喉拭子

观察鼻、喉部黏膜，余同上

直接擦拭鼻、喉部黏膜，次数及其他同上，立即送检

肺泡灌洗液

无菌瓶

肺泡首次灌洗液用于病原学检查效果优于第2次及第3次灌洗液的效果。无菌操作，立即送检

胸腔积液

无菌瓶

抽吸法采集，立即送检

痰

无菌瓶（集痰器）

抽吸采集、自然咳出采集前用生理盐水漱口，立即送检；晨痰最佳

血清学检测

末梢血

末梢抗凝管

新生儿选取足跟内侧缘或外侧缘部位采血：≥29d的患者选择左手无名指指尖尺侧采血（具体参考年《中国末梢采血操作共识》）

静脉血

血清管、血浆管、全血抗凝管

血清、血浆或全血的采集严格按照CLSI（GP41A6）执行

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